項目介紹：

透射電鏡(TEM)利用電子束作光源，用電磁場作透鏡，經加速和聚集的電子束投射到非常薄的樣品上，形成明暗不同的影像，TEM在中和物理學和生物學相關的許多科學領域都是重要的分析方法，如基礎醫(yī)學研究、病毒學、材料科學、以及納米技術、半導體研究等等。透射電子顯微鏡的分辨率比光學顯微鏡高的很多，分辨力可達0.2nm，200-200k倍之間連續(xù)可調; 可以用于觀察樣品的精細結構，甚至可以用于觀察僅僅一列分子的結構。

　　透射電鏡(TEM)，全稱透射電子顯微鏡，是把經加速和聚集的電子束投射到超薄切片的樣品上(通常70-90nm)，電子與樣品中的原子碰撞而改變方向，從而產生立體角散射。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關，因此可以形成明暗不同的影像，影像將在放大、聚焦后在成像器件上顯示出來。是一種高分辨率(0.1nm-0.2nm)、高放大倍數(shù)(0.2K-600K)的顯微鏡。是觀察和研究物質超微結構的強有力工具。透射電鏡在細胞生物學、組織學、病毒學、病理學、分子生物學、材料科學等諸多領域具有廣泛應用?？梢杂^測動物植物細胞超微結構，如線粒體、內質網、高爾基體、溶酶體、葉綠體、液泡、細胞內生細菌等結構及病理變化?？梢杂^測病毒顆粒、外泌體、病原微生物、各類細菌真菌、納米材料及納米顆粒、晶體結構。

實驗流程：

　　包埋-制片-拍照

結果展示：

送樣運輸要求：

以下所有樣本必須盡量新鮮，固定液或懸浮液都不得冷凍結冰!

1、動物組織樣本

①1-3min內取樣，取樣組織2mmX2mm大小，盡量薄。如來不及修整組織大小可先于電鏡固定液內固定半小時左右待組織變硬以后再修整組織進行后固定。超出此范圍后組織會無法完全固定，后續(xù)實驗無法完成，務必請重視此過程

②取材時盡量精確到需要觀察的目的部位(如觀察腎小球取腎皮質;觀察胰島取胰島豐富的胰尾;皮膚，腸胃等在固定液中易打卷的組織可將組織粘在濾紙上進行固定)。

③取材時一定注意避免鑷子擠壓等機械損傷，刀片要鋒利避免挫傷組織。

④組織取下后立即投入電鏡固定液內室溫固定2h，再轉移至4°保存，4°冰袋運輸，在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。4°時樣本可保存1個月左右

2、植物組織樣本

①取材要求同動物組織樣本。

②組織投入固定液后需要進行真空抽氣讓組織沉底，如無條件抽氣可用濾紙將組織塞進固定液內，組織不能漂浮在固定液表面。

3、細胞樣本

貼壁細胞：

方法一：

①培養(yǎng)好的細胞棄培養(yǎng)基，加入2.5%的常溫戊二醛固定液。

②常溫固定5min左右，用細胞刮(或軟橡膠蓋切得平整小方塊)沿一個方向輕輕刮下細胞，切記不要反復刮，避免細胞刮破。

③用巴氏吸管把細胞液吸入離心管內，放入離心機(不超過3000轉)，離心2min左右，細胞團要有綠豆大小。

④棄固定液后加新的電鏡固定液，把細胞團輕輕挑起，懸浮于固定液中。

⑥室溫避光固定30min，再轉移至4°保存，4°冰袋運輸，在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

方法二：(對細胞形態(tài)沒有要求的)

①培養(yǎng)好的細胞棄培養(yǎng)基，加入胰酶。

②胰酶消化好后(時間不宜過長)，用培養(yǎng)基終止消化，用吸管把細胞吹下來。吸入離心管，離心(不超過3000轉)，2min左右，細胞團要有綠豆大小。

③棄上清，加入2.5%的常溫戊二醛固定液，把細胞團輕輕挑起，懸浮于固定液中。

④室溫避光固定30min，再轉移至4°保存，4°冰袋運輸，在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

懸浮細胞：離心收集細胞要肉眼可見細胞沉淀綠豆大小，棄培養(yǎng)基后加電鏡固定液室溫固定2h，再轉移至4°保存，4°冰袋運輸，在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

4、細菌樣本

長于固體培養(yǎng)基的細菌：連帶著培養(yǎng)基一起挑下細菌放于電鏡固定液內室溫固定2h，再轉移至4°保存， 4°冰袋運輸，在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

懸浮細菌孢子等：離心收集細菌要肉眼可見細菌沉淀綠豆大小，棄培養(yǎng)基后加電鏡固定液室溫固定2h，再轉移至4°保存，4°冰袋運輸，在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

5、病毒

破碎組織細胞，粗離心去除細胞碎片取上清，超速離心分離出病毒(病毒提取的過程需要客戶自己完成)。用緩沖液(如PBS)懸浮病毒，遠距離-80°凍存運輸，近距離4°保存運輸，盡快滴片做負染后及時電鏡觀察拍照。

6、外秘體囊泡等

客戶自己完成外秘體囊泡等的提取收集，用緩沖液(如PBS)或者試劑盒中的保存液懸浮，遠距離-80°凍存運輸，近距離4°保存運輸，盡快制片做負染后及時電鏡觀察拍照。(因此類樣品極易降解，樣品越新鮮越好，最好數(shù)小時內完成滴片負染，否則做出的效果很不理想甚至完全觀察不到)

7、納米材料等無機材料

直接準備粉劑或用緩沖液(如PBS)懸浮，常溫保存運輸即可(需要超聲的備注)。做負染后電鏡觀察拍照。

注意事項：

1.拍照需要求簡潔清楚，有側重點。需附參考圖或參考文獻(如有特殊要求請?zhí)崆皞渥⒄f明)

2.拍照倍數(shù)由參考文獻效果圖來確定(不同機器不同廠家倍數(shù)標準不同，不能互通參考)

3.圖片本身左下角附有拍照倍數(shù)(X-K 單位千倍)，右下角附有標尺(十格總長即為標尺所注長度)